Micropropagacion y análisis de la metilación del ADN en actinidia y olea

Abstract

Se establecen métodos de micropropagación para dos especies leñosas: kiwi y olivo. Mientras el kiwi es considerado como un cultivo dúctil, el olivo es considerado como recalcitrante. En actinidia se establecieron suspensiones celulares, lográndose la regeneración de plantas a partir de plaqueos y transferencia de los callos a un medio con zeatina. Asimismo, en olivo se logro mantener células en suspensión creciendo en un medio con ana y zeatina. Los factores que afectan al aislamiento y cultivo de protoplastos aislados a partir de dichas suspensiones celulares así como de tejido foliar se han estudiado en este trabajo. Análisis de metilación del adn han demostrado que los cultivos celulares de kiwi y de olivo presentan una hipermetilación del adn derivada del uso de 2,4-d. Por el contrario, el empleo de combinaciones con citoquinina resulta hipometilante. De estos resultados se concluye que las combinaciones hormonales utilizadas para iniciar cultivos desorganizados pueden provocar aumentos considerables de la metilación del adn. Este estado de metilación ha de ser revertido durante la inducción de procesos morfogénicos. El uso de citoquininas parece que revierte el efecto hipermetilante de algunas combinaciones, especialmente del 2,4-d.