Caracterización de tres genes estructurales que codifican acetiltransferasas modificadoras de aminoglicosidos

Abstract

Los aminoglicosidos son antibioticos producidos por organismos de los generos streptomyces y micromomospora, que inhiben la sintesis proteica. De los mecanismos de resistencia que los afectan en la produccion de enzimas modificadoras el que tiene mayores implicaciones negativas. En este trabajo se describe la clonacion de tres genes de resistencia a aminoglicosidos, asi como la realizacion de estudios estructurales y funcionales. Un gen aacc1 con una región estructural de 531 nucliótidos que codifica una proteina de 19 kda con actividad acetiltransferasa de tipo 3 i. Este gen se encuentra insertado en dos puntos activos presentes en el gen de resistencia a estreptomicina del tn21. Este mecanismo de inserción parece que juega un papel importante en la evolución de plásmidos la dispersión de genes de resistencia. Un gen aacc2 con una región estructural de 858 nucleótidos que codifica una proteina de unos 30 kda con actividad acetiltransferasa de tipo 3 II. Algunos datos apoyan la hipótesis de que este gen tiene su origen en los organismos productores de antibióticos, y el más importante es la gran homología que presenta con un gen de s.rimousus que codifica una actividad similar a la 3 II. Y un gran aaca1 con una región estructural de 432 nucleótidos que codifica una proteina de unos 16 kda con actividad acetiltransferasa de tipo 6 I. Este gen es diferente, tanto por el producto génico como por sus secuencia, con otros dos genes de tipo aaca1 que han sido clonados y secuenciados anteriormente. Por otro lado, se han diseñado sondas representativas de los genes clonados, y se han ensayado mediante hibridación frente al adn de cepas y plásmidos control. Se ha comprobado que estas sondas son específicas, y su posible aplicación es la realización de estudios de epidemiología molecular.