Desarrollo de modelos murinos con líneas celulares de carcinomas nasosinusales

Abstract

Los tumores malignos originados en las fosas nasales (FN) y senos paranasales (SP) tienen características propias que los diferencian del resto de neoplasias de la vía aerodigestiva superior (VAS). Su baja incidencia y alta diversidad histológica son un obstáculo para su estudio. Los tipos histopatológicos más frecuentes son los carcinomas, entre los que destacan los adenocarcinomas nasosinusales (ACNS), concretamente la variedad tipo intestinal (ITAC), y los carcinomas escamosos nasosinusales (CENS). En los últimos años se han desarrollado modelos funcionales, in vitro, con líneas celulares e in vivo, con modelos animales, con aplicación al estudio del cáncer y al desarrollo de nuevas terapias. Los objetivos de nuestro trabajo son: -Realizar un modelo xenoinjerto murino subcutáneo implantando las líneas de células tumorales ITAC-3 y NC-4. -Diseñar y realizar un modelo xenoinjerto murino ortotópico implantando en FN y SP las mismas líneas celulares. -Describir el patrón histopatológico y genético con MLPA y m-CGH, así como la expresión proteica mediante IHQ de los tumores murinos producidos. -Comparar el patrón genético y de expresión de los tumores murinos con el de los tumores origen y las líneas celulares, con el fin de establecer similitudes y diferencias, además de confirmar la fidelidad de las líneas y modelos. Para realizar este estudio utilizamos 2 líneas celulares, una procedente de un ACNS, denominada ITAC-3 previamente establecida; y otra, procedente de un CENS, denominada NC-4, recientemente caracterizada. El número total y tipo de animales estudiados consistió en: - 2 ratas wistar y 2 ratones swiss machos de 5 semanas de edad. - 4 ratas nude macho de 5 semanas. - 40 ratones nude macho de 5 semanas. En el estudio genético utilizamos el ADN procedente del tumor origen, las células cultivadas y los tumores murinos. Una vez extraído el ADN se estudia por medio de m-CGH y MLPA. La Inmunohistoquímica se realizó para estudiar la expresión en el CENS y ACNS origen. Con la línea NC-4, obtuvimos resultado positivo a nivel macro y microscópico en 5/5 de los ratones implantados en el tejido subcutáneo y en 7/20 de los empleados para el modelo ortotópico. En todos los casos positivos, el análisis histopatológico reveló la presencia de un carcinoma escamosos de poco a moderadamente diferenciado. Con ITAC-3 no obtuvimos resultado positivo en ningún caso y en ningún modelo. Respecto al análisis genético-molecular, en general, las muestras comparadas comparten el mismo patrón de alteraciones, así como el análisis IHQ.