Functional analysis and development of novel marked vaccines against Myxoma virus

Abstract

En esta tesis doctoral se propuso desarrollar una herramienta para controlar la enfermedad, basada en una vacuna DIVA, para lo cual se postuló la construcción de un virus mixoma recombinante marcado por deleción de un gen antigénico, además de una prueba serológica diferencial capaz de distinguir animales infectados de los vacunados. Tras una exhaustiva revisión bibliográfica se seleccionaron 6 proteínas virales candidatas a tener carácter antigénico y a ser delecionadas: M022, M029, M71, M083, M115 y M141. Se procedió al diseño y clonaje de los genes codificantes seleccionadas en vectores de expresión. La producción de cada proteína se optimizó individualmente en los sistemas de expresión heteróloga considerados para ello: procariota y/o basado en la generación de baculovirus recombinantes. Las proteínas M022, M083 y M115 consiguieron purificarse en forma soluble. Mientras M083 no mostró carácter antigénico, las otras dos proteínas mostraron la presencia de epítopos lineales (M115) y conformacionales (M115 y M022).