Diseño de un protocolo de PCR-HRM para el diagnóstico de las dos variantes del Adenovirus canino tipo I en la población de lobos de Asturias

Abstract

El Adenovirus Canino tipo I (CAdV-1), responsable de la Hepatitis Canina Infecciosa (HIC), es una de las enfermedades más comunes entre mamíferos, más concretamente entre animales salvajes, ya que la prevalencia de este virus entre animales domésticos ha disminuido gracias a la vacunación. Es por ello que, el oso pardo, especie en riesgo en la región de Asturias, se ha visto afectado por este virus. Con el objeto de estudiar la procedencia de este virus, se muestreó ADN procedente de diferentes lobos de la región, lo cual dio como resultado el descubrimiento de una mutación en una base nucleotídica en el CAdV-1. Atendiendo a estas consideraciones, en este Trabajo fin de Máster, se ha desarrollado un protocolo de PCR-HRM (Polimerase Chain Reaction - High Resolution Melting) con el objetivo de ser capaces de diagnosticar las dos variantes del CAdV-1 en muestras de ADN extraído del bazo de diferentes lobos de la región. Para ello se desarrollaron diferentes protocolos a partir del diseño de primers específicos para el segmento de la secuencia en la que se encuentra la mutación.