Determinación de rendimientos cuánticos de fluorescencia por métodos indirectos
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Subject:
Química Analítica
Fluorescencia
Publication date:
Serie:
Máster Universitario en Ciencias Analíticas y Bioanalíticas
Abstract:
El rendimiento cuántico de fluorescencia es un parámetro que permite cuantificar la fluorescencia de los compuestos. El objetivo de este trabajo es determinar ese parámetro. En la bibliografía se han encontrado dos métodos: el método absoluto y el método relativo o indirecto. El primero de ellos no puede llevarse a cabo por no disponer de la instrumentación necesaria; por tanto, se aplica el método relativo. El método indirecto consiste en determinar el rendimiento cuántico de fluorescencia de un compuesto comparándolo con el rendimiento cuántico de un patrón de fluorescencia (cuyo rendimiento cuántico es un valor perfectamente conocido). Para poder aplicar este método es necesario que el patrón y la muestra se midan en las mismas condiciones. En el caso de compuestos muy fluorescentes (y que, por ende, tienen rendimientos cuánticos de fluorescencia similares a los del patrón utilizado) es posible aplicar directamente el método indirecto. Para compuestos en los que el rendimiento cuántico de la muestra es muy inferior al del patrón empleado el método indirecto como tal proporciona importantes errores; por ello, se ponen a punto dos alternativas con el fin de subsanar ese problema: el método de la variación de las rendijas y el método del quenching. El primero de ellos se basa en realizar las medidas del patrón y de la muestra en distintas condiciones y aplicar un factor de corrección al patrón para que las medidas sean equivalentes a si se hubiesen realizado en esas mismas condiciones. El método del quenching se basa en añadir al patrón un compuesto que disminuya su fluorescencia (y, con ello, su rendimiento cuántico) para poder realizar las medidas del patrón (desactivado) y de las muestras en las mismas condiciones (tal como indica el método indirecto).
El rendimiento cuántico de fluorescencia es un parámetro que permite cuantificar la fluorescencia de los compuestos. El objetivo de este trabajo es determinar ese parámetro. En la bibliografía se han encontrado dos métodos: el método absoluto y el método relativo o indirecto. El primero de ellos no puede llevarse a cabo por no disponer de la instrumentación necesaria; por tanto, se aplica el método relativo. El método indirecto consiste en determinar el rendimiento cuántico de fluorescencia de un compuesto comparándolo con el rendimiento cuántico de un patrón de fluorescencia (cuyo rendimiento cuántico es un valor perfectamente conocido). Para poder aplicar este método es necesario que el patrón y la muestra se midan en las mismas condiciones. En el caso de compuestos muy fluorescentes (y que, por ende, tienen rendimientos cuánticos de fluorescencia similares a los del patrón utilizado) es posible aplicar directamente el método indirecto. Para compuestos en los que el rendimiento cuántico de la muestra es muy inferior al del patrón empleado el método indirecto como tal proporciona importantes errores; por ello, se ponen a punto dos alternativas con el fin de subsanar ese problema: el método de la variación de las rendijas y el método del quenching. El primero de ellos se basa en realizar las medidas del patrón y de la muestra en distintas condiciones y aplicar un factor de corrección al patrón para que las medidas sean equivalentes a si se hubiesen realizado en esas mismas condiciones. El método del quenching se basa en añadir al patrón un compuesto que disminuya su fluorescencia (y, con ello, su rendimiento cuántico) para poder realizar las medidas del patrón (desactivado) y de las muestras en las mismas condiciones (tal como indica el método indirecto).
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