Influencia del estadío celular y de los sistemas de reparación del DNA en el espectro molecular de las mutaciones inducidas por agentes genotóxicos

Abstract

En la presente Tesis se analiza la influencia que diferentes factores tienen sobre los mecanismos de inducción de mutaciones, utilizando para ello el sistema vermilion de Drosophila melanogaster. En primer lugar se analiza la posible existente de complementación intragénica en el locus vermilion. Los resultados obtenidos reafirman la fiabilidad del sistema empleado. El espectro molecular de mutación inducido con N-etil-n-nitrosourea(ENU) en estadios premeióticos opone de manifiesto la gran semejanza que existe con los datos disponibles en ratón in vivo. Ambos espectros están formados principalmente por mutaciones en sitios AT, resultado de alquilaciones en los oxígenos de la timina, observándose una eficiente reparación, en estos estadios, del resto de alquilaciones inducidas por ENU. Se han analizado dos sistemas de reparación, el sistema de reparación postreplicativa, mediante el empleo de la mutacion mus308, y el sistema de reparación por excisión de nucleótido (NER),mediante el mutante mus201. Se han obtenido los espectros moleculares de mutación inducidos con ENU en estadios postmeióticos, utilizando lineas deficientes en esos sistemas de reparación. Los resultados obtenidos muestran que el locus mus308 está implicado en el bypass postreplicativo, posiblemente mediado por recombinación, de aductos en los oxígenos de las pirimidinas. Su función es incrementar el tiempo disponible por las células para la reparación libre de error de esos daños por otros sistemas de reparación. Además, del análisis del sistema NER de Drosophila se desprende su implicación en la reparación del daño inducido por ENU. En concreto,este sistema repara alquilaciones en los átomos de nitrógeno, alquilaciones en el O 6-guanina y/o O 4-timina, y muy probablemente también en el O 2-timina. La reparación de estos daños depende por tanto de la acción de, al menos, dos sistemas, el sistema de reparación postreplicativa en el que