Bases moleculares de la resistencia y la virulencia en la variante monofásica 4, (5), 12:I:- de Salmonella entérica serotipo Typhimurium

Abstract

Los serotipos no tifoideos de Salmonella enterica son causantes de un gran número de infecciones tanto en seres humanos como en animales. Por ello, las medidas para su prevención y control son importantes no solamente a nivel sanitario sino también social y económico. En este contexto, la variante monofásica 4,[5],12:i:- del serotipo Typhimurium, detectada por primera vez en los años 90, ha visto incrementada su incidencia a nivel mundial. Los aislamientos que circulan en Europa pertenecen mayoritariamente a dos líneas multirresistentes (MDR): clon europeo y clon español, que se transmiten a través de la cadena alimentaria desde su principal reservorio, el ganado porcino. Esta Tesis Doctoral se centra en el estudio de aislamientos pertenecientes a la variante monofásica 4,[5],12:i:- procedentes de España y diversos países europeos, con el objetivo de ampliar la información sobre su origen, dispersión y evolución, y conocer las bases moleculares de la virulencia y la resistencia a antimicrobianos. Se confirmó como antecesor más probable al serotipo Typhimurium y se establecieron las bases moleculares del fenotipo monofásico que involucra, en todos los casos, la inserción de al menos una copia de la secuencia de inserción IS26 en el locus fljAB. Mediante técnicas de tipificación molecular (XbaI-PFGE, MLVA y MLST) se demostró la elevada homogeneidad genética de los aislamientos monofásicos y su estrecha relación con aislamientos bifásicos de Typhimurium. Utilizando un microchip de ADN se observó una escasa variabilidad de perfiles de patogenicidad en lo que se refiere a islas (SPIs) e islotes de patogenicidad y a fimbrias, y su similitud con los mostrados por cepas bifásicas. Sin embargo, pudieron establecerse diferencias en cuanto al contenido en profagos que portan genes de virulencia, entre los clones español y europeo y respecto a aislamientos bifásicos de Typhimurium. Se puso de manifiesto la prevalencia de plásmidos MDR IncA/C en los aislamientos del clon español, que en su mayoría portan además genes de virulencia característicos de pSLT. La secuenciación de uno de ellos (pUO-STmRV1) desveló su estructura modular y la presencia de numerosos integrones y elementos transponibles. En los aislamientos del clon europeo se corroboró la ausencia de plásmidos y la localización de los genes responsables de la MDR en el cromosoma bacteriano. La secuenciación de esta región desveló que su origen es probablemente plasmídico, constituyendo un ejemplo de estabilización de funciones adaptativas por integración en el cromosoma. Finalmente se identificaron marcadores moleculares que permiten la diferenciación de las dos líneas monofásicas prevalentes en Europa y pueden ser de utilidad para su seguimiento epidemiológico. Además, se detectaron otros clones MDR que portan plásmidos híbridos y cuya vigilancia deberá realizarse.