Análisis de biotoxinas marinas mediante cultivos neuronales de cerebelo de rata. Caracterización de los efectos neurotóxicos del ácido okadaico

Abstract

Las neuronas granulares de cerebelo de rata fueron utilizadas en este trabajo para evaluar el contenido de toxinas paralíticas, amnésicas y diarréicas en bivalvos marinos comestibles. La concentración de toxina en extractos de moluscos se calculó a partir de las curvas de toxicidad, que expresan la relación entre el contenido de toxina en el medio de cultivo y la supervivencia neuronal. Los resultados se compararon con datos obtenidos por bioensayo en ratón y hplc, observándose una alta correlación en la mayoría de los casos. El uso de antagonistas específicos de los receptores sobre los que actúan algunas de las toxinas, demostró ser útil en la identificación de los grupos individuales de toxinas y confirmó la conveniencia del método para la detección de compuestos tóxicos marinos con diferentes mecanismos de acción. En este trabajo se demuestra además que la neurotoxicidad inducida por el ácido okadaico (oka) en las neuronas cerebelares de rata implica la fragmentación del adn características de la apoptosis y depende tanto de la síntesis de proteínas, como de la inhibición de proteín fosfatasas, fundamentalmente de la 2a. Se estudió el papel protector de diferentes agentes neurotróficos, de la fosforilación de proteínas por proteín quinasa c (pkc), así como de la concentración de calcio intracelular y extracelular ante la toxicidad por oka. Dicha toxicidad fue retrasada inhibiendo la pkc o aumentando la concentración de calcio intracelular y totalmente prevenida con el factor de crecimiento igf-1. Las neurotrofinas nt-3 y bdnf no presentaron ningún efecto protector ante la neurotoxicidad apoptótica inducida por oka, que fue además potenciada por la reducción de la concentración de calcio extracelular [...]