La señalización por glucosa en Saccharomyces cerevisiae a través de un mecanismo nuevo dependiente de hexoquinasa 2

Abstract

Dos de las proteínas más importantes implicadas en la represión por glucosa en Saccharomyces cerevisiae son Mig1 y Hxk2. El mecanismo a través del que opera la proteína Hxk2 no se conoce con precisión pero la parte dependiente de Mig1 se conoce con gran detalle. En este trabajo demostramos que la proteína Hxk2 tiene una localización nuclear regulada por glucosa y que Mig1, un represor transcripcional responsable de la represión por glucosa de muchos genes, se requiere para retener a la proteína Hxk2 en el núcleo. Mig1 y Hxk2 interaccionan in vivo en un ensayo de doble híbrido e in vitro en experimentos de inmunoprecipitación y coprecipitación tipo "GST-pull down". Hemos encontrado que el decapéptido K6-M15 de la Hxk2, que es necesario para la localización nuclear de la proteína, es también esencial para la interacción con Mig1. Nuestros resultados demuestran que la interacción Hxk2-Mig1 es fisiológicamente significativa pues ambas proteínas se han detectado en un complejo con fragmentos de DNA que contienen el sitio MIG1 del promotor SUC2 tanto in vivo como in vitro. También hemos encontrado que la S311 de Mig1 es esencial para la interacción con la proteína Hxk2 y para la localización dependiente de Snf1 de Mig1. Concluimos que Hxk2 opera por interacción con Mig1, inhibiendo su fosforilación durante el crecimiento en alta glucosa y generando un complejo represor que se localiza en el promotor de los genes de S. cerevisiae regulados por Mig1.