Caracterización de una región del cromosoma de Streptomyces antibioticus implicada en la biosíntesis y resistencia a oleandomicina
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A partir de una genoteca de Streptomyces antibioticus, se seleccionó el clon cosAB35 como posible portador de al menos parte de la ruta de biosíntesis del antibiótico oleandomicina. En este clon se secuenció, en primer lugar, una región de 11,5 kb que hibridaba con genes de biosíntesis de otros antibióticos macrólidos. El análisis de esta secuencia permitió detectar dos pautas abiertas de lectura: ORF1 (incompleta) y ORF2 (completa). El producto génico deducido a partir de la ORF2 mostraba gran homología con poliquétido sintetasas tipo I y esta enzima posiblemente lleve a cabo la síntesis del anillo lactona de la oleandomicina. Este gen (ORF2) no presenta un contenido en GC total ni un uso de codones típico de los genes de Streptomyces. Su % GC en la tercera posición de cada codón es el más bajo conocido para un gen de Streptomyces. El porcentaje de codones terminando en T (20,2%) es muy superior al de los genes de Streptomyces (3,6%) y ello va acompañado de una disminución de codones terminando en C. En segundo lugar, se secuenció otra región del clon cosAB35, la cual confería resistencia a oleandomicina. El análisis de esta secuencia permitió detectar dos pautas abiertas de lectura que se transcribían en sentidos opuestos y convergentes: OLEP (es un citocromo P450) y OLEB (es un ABC transportador).
A partir de una genoteca de Streptomyces antibioticus, se seleccionó el clon cosAB35 como posible portador de al menos parte de la ruta de biosíntesis del antibiótico oleandomicina. En este clon se secuenció, en primer lugar, una región de 11,5 kb que hibridaba con genes de biosíntesis de otros antibióticos macrólidos. El análisis de esta secuencia permitió detectar dos pautas abiertas de lectura: ORF1 (incompleta) y ORF2 (completa). El producto génico deducido a partir de la ORF2 mostraba gran homología con poliquétido sintetasas tipo I y esta enzima posiblemente lleve a cabo la síntesis del anillo lactona de la oleandomicina. Este gen (ORF2) no presenta un contenido en GC total ni un uso de codones típico de los genes de Streptomyces. Su % GC en la tercera posición de cada codón es el más bajo conocido para un gen de Streptomyces. El porcentaje de codones terminando en T (20,2%) es muy superior al de los genes de Streptomyces (3,6%) y ello va acompañado de una disminución de codones terminando en C. En segundo lugar, se secuenció otra región del clon cosAB35, la cual confería resistencia a oleandomicina. El análisis de esta secuencia permitió detectar dos pautas abiertas de lectura que se transcribían en sentidos opuestos y convergentes: OLEP (es un citocromo P450) y OLEB (es un ABC transportador).
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Notas Locales:
Tesis 1993-173
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