Activación in vitro del sistema RAS-adenilato ciclasa de Saccharomyces cerevisiae por la glucosa y sus análogos

Abstract

Se ha puesto a punto un sistema in vitro que reproduce el efecto fisiológico de la glucosa sobre la adenilato ciclasa de Saccharomyces cerevisiae. El método consiste en la determinación de la actividad del enzima en preparaciones de membrana procedentes de diferentes cepas de levadura, y obtenidas en distintas condiciones metabólicas. El efecto detectado presenta especificidad para condiciones de desrepresión, y una KM aparente de 25 mm. La 6-desoxiglucosa es el análogo de glucosa que resulta un estimulador más potente. El mecanismo de acción de los azucares consiste en incrementar la tasa de recambio de nucleótidos en las proteínas RAS. Utilizando este sistema, se ha demostrado que la acidificación intracelular que provoca la glucosa in vivo tiene un papel primordial en la transducción de la señal. Por otro lado, se ha estudiado la participación del producto del gen CDC25 en el recambio de nucleótidos en las proteínas RAS. Se ha observado que, en estas condiciones experimentales, la tasa de recambio de nucleótidos no depende de esta proteína.