Purificación, caracterización y análisis de la interacción con el ADN de una desoxirriboendonucleasa de streptomyces antibioticus

Abstract

Se ha purificado y caracterizado una desoxirriboendonucleasa de streptomyces antibioticus la enzima corta ADN de doble cadena, preferentemente en secuencias de tres o más guaninas seguidas. En ausencia de éstas, la nucleasa hidroliza otras secuencias alternativas. La especificidad mostrada por la enzima para la hidrólisis de los sustratos se puede considerar en cierto modo intermedia entre las de endonucleasas de restricción y otras nucleasas más inespecíficas como DNasa I. La utilización de sustratos con bases modificadas químicamente, junto con experimentos de interacción con el ADN han mostrado que la nucleasa se une débil e inespecíficamente con ambos surcos de la doble hebra. Mediante experimentos de inmunomicroscopía e inmunodetección se demostró una localización a nivel de la pared celular para la enzima; así como la ausencia de la proteína en medios represivos.