Regulación transcripcional y post-traduccional de la isocitrato liasa de Saccharomyces cerevisiae

Abstract

La expresión del gen ICL1 de Saccharomyces cerevisiae, que codifica a la isocitratoliasa un enzima clave del ciclo del glioxilato, está fuertemente controlado. La presencia en el medio de cultivo de compuestos de dos átomos de carbono tales como el etanol o el acetato inducen la expresión del gen mientras que la glucosa provoca su represión. La búsqueda de los elementos del promotor del gen ICL1 responsables de este tipo de regulación condujo a la identificación de una secuencia activadora anterior (UAS) y una secuencia represora (URS) (Fernández y col., 1993; Scholer y Schuller, 1994). Nosotros hemos caracterizado la región que contiene la URS, además se han identificado las proteínas que interaccionan con los dos elementos reguladores y el papel de los genes MIG1 y SNF1 (CAT1) en la unión de las proteínas reguladoras a sus secuencias blanco. La adición de glucosa a células adaptadas al crecimiento en presencia de etanol induce la fosforilación e inactivación irreversible del enzima. En este trabajo se ha comprobado la implicación de los genes TPK1 y TPK2 que codifican a las subunidades catalíticas de las proteinquinasas dependientes de AMPC en la fosforilación del enzima. Se ha estudiado el papel de las treoninas 53 y 343, en la inactivación mediante mutagénesis dirigida. Además hemos identificado una secuencia de degradación de la isocitrato liasa demostrando la implicación del proteasoma en dicha degradación.