Caracterización genómica funcional de la anexina V

Abstract

Hemos aislado y caracterizado el cDNA de la anexina V de ratón a partir de una genoteca de macrófagos murinos. Su secuencia nos ha permitido identificar dos nuevas secuencias en las bases de datos que hemos clasificado como anexinas V, en carpa y pez cebra. La secuencia de aminoácidos deducida de la de nucleótidos del cDNA de ratón nos permitió su comparación con la de otras especies en la que estaba descrita esta proteína y pudimos realizar un estudio filogenético de la subfamilia. Además nos permitió calcular una tasa de cambio de aminoácidos de 0,04. Utilizando el cDNA como sonda se aisló y caracterizó el gen correspondiente que abarca aproximadamente 50 Kb del genoma del ratón y está formado por 14 exones y 13 intrones. El exón 1(no codificante) se presenta en dos formas alternativas que llevan asociados dos promotores con características distintas: uno con caja TATA y otro sin ella, con un alto contenido en G+C y con varios posibles sitios de unión para el factor de transcripción Sp1. Además en el intrón 4 se localizó un retrovirus endógeno MuERV-L. Por otra parte, se purificó la proteína humana recombinante y se utilizó como antígeno en ensayos ELISA con sueros de pacientes con artritis reumatoide. Se encontraron niveles elevados de autoanticuerpos contra la anexina V del tipo IgG en los enfermos, comparándolos con los controles sanos.