Comparación de perfiles de metilación de genes supresores tumorales en distintos subgrupos de tumores vesicales no músculo-invasivos

Abstract

Existen factores tanto genéticos como epigenéticos involucrados en la tumorogénesis y progresión del cáncer de vejiga. El papel de los factores epigenéticos para la diferenciación patológica y clínica de los distintos subgrupos no ha sido aún bien definida. Nuestro objetivo fue evaluar el papel del estado de metilación de 25 genes supresores de tumores (GST) para discriminar entre los distintos subtipos de tumor de vejiga no músculo-invasivo y su papel como marcador pronóstico. MÉTODOS: Se realiza un diseño retrospectivo en muestras de tumor incluidas en parafina de 79, 81 y 91 pacientes con tumor primario no músculo invasivo Ta de bajo grado (TaBG), T1 de bajo grado (T1BG) y T1 de alto grado (T1AG) respectivamente. El estado de metilación de los 25 genes fue medido utilizando una técnica de amplificación múltiple de sondas dependientes de ligación y específica de metilación (MS-MLPA), tomándose como umbrales los valores de 0.3 y 0.5. Recidiva, progresión a tumor músculo invasor y supervivencia cáncer-específica fueron analizados usando el test univariado y multivariado de Cox. RESULTADOS: El gen más frecuentemente metilado fue el STK11, presentando un porcentaje de metilación de 98,73% en TaBG, de 98,76% en T1BG y de 93,41 en T1AG para el un índice de metilación (IM) mayor de 0.3 y de 97.5%, 93.8% y 87.9, respectivamente, para IM>0.5. La metilación de varios GST fue significativamente asociada con variables clínico-patológicas cuando los analizamos juntos y por subgrupos. Para el umbral 0.3, en el análisis univariado, se obtuvo asociación con el tiempo libre de enfermedad para PAX5 (p=0.016), WT1 (p=0.036) y BRCA1 (p=0.023) en TaBG, para VHL (p=0.034), PAX6 (p=0.043), ATM (p=0.009), CHFR (p=0.049) y RB1 (p=0.013) para T1BG y para PYCARD (p=0.027) en T1AG. En el análisis multivariado, se obtuvieron como factores independientes de recidiva los genes PAX5 (p=0.019), WT1 (p=0.042) y BRCA1 (p=0.023) en TaBG, PAX6 (p=0.044), ATM (p=0.004), CHFR (p=0.035) y RB1 (p=0.007) en T1BG and PYCARD (p=0.035) en T1AG. No se obtuvo asociación para ningún gen con progresión ni supervivencia cáncer-específica en el estudio uni ni multivariado. Cuando se tomó como umbral un IM>0.5, en el análisis univariado, se obtuvo asociación con el tiempo libre de enfermedad para WT1 (p=0.019), GSTP1 (p=0.034) y BRCA1 (p=0.031) en TaBG, para CDKN2A (p=0.022), PAX6 (p=0.026), ATM (p=0.002) y RB1 (p=0.006) para T1BG y para PAX5A (p=0.04), PTEN (p=0.017) y PYCARD (p=0.007) en T1AG. En el análisis multivariado, se confirmaron los genes WT1 (p=0.014), GSTP1 (p=0.034) y BRCA1 (p=0.034) en TaBG, CDKN2A (p=0.013), PAX6 (p=0.014), ATM (p=0.025) y RB1 (p=0.007) para T1BG y PYCARD (p=0.039) en T1AG. Se asoció la metilación del PYCARD en el estudio uni (p=0.043) y multivariado (p=0.043) con la progresión en tumores de alto grado, pero no se obtuvo ningún gen relacionado con la supervivencia cáncer específica. CONCLUSIONES: Los perfiles de metilación de GST distinguen tumores no músculo invasivos dependiendo de su fenotipo clínico-patológico. El estado de metilación de algunos de ellos se correlaciona con la evolución clínica de los pacientes en lo que se refiere a recidiva y progresión, no obteniéndose asociaciones para la supervivencia cáncer-específica. La metilación de GST puede seleccionar pacientes con tumor no músculo invasivo que puedan requerir una intervención terapéutica más agresiva.