Análisis funcional de promotores de Lactococcus lactis que responden al daño de la pared celular

Abstract

Lactococcus lactis es una bacteria utilizada como cultivo iniciador en la industria quesera y como factoría celular para la producción de compuestos de interés biotecnológico (vacunas, antimicrobianos, enzimas, etc.). El éxito de ambas aplicaciones depende de la viabilidad y actividad metabólica de esta bacteria en las condiciones adversas, inherentes a estos procesos industriales. Nuestro objetivo es conocer cómo L. lactis responde al daño de la pared celular y sus mecanismos de defensa con vistas a desarrollar estrategias para la selección de cepas más robustas y eficientes. Nuestro grupo de investigación ha identificado las principales rutas de respuesta al daño de la pared de L. lactis, así como los posibles genes regulados, muchos de ellos de función desconocida. Actualmente, llevamos a cabo la caracterización funcional de estos circuitos de señalización y mecanismos de defensa para lograr una visión global de la respuesta de L. lactis al daño de la pared celular. Las aproximaciones experimentales que utilizamos incluyen clonación y/o inactivación de genes y la caracterización fenotípica, genética y tecnológica de mutantes. Se aplican, por tanto, técnicas de Microbiología (ensayos de antagonismo, de viabilidad y propagación de bacteriófagos) y Biología Molecular, incluyendo técnicas de alto rendimiento como secuenciación masiva y RNA-seq. Otras técnicas como la purificación de proteínas y/o ensayos enzimáticos también son abordadas para la validación de los resultados en función del gen de interés.