Técnicas de inmunomarcaje a nivel ultraestructural

Abstract

La necesidad de los investigadores por encontrar el método más adecuado para observar la estructura celular y tisular no ha dejado de aumentar desde la invención del primer microscopio óptico a principios del siglo XVII. Además, el interés por marcar una zona concreta de la muestra ha sido el origen de las técnicas actuales de inmunomarcaje. Por otro lado, las limitaciones del microscopio óptico condujeron a la invención de la microscopía electrónica. En este trabajo se recogen las características, ventajas e inconvenientes de un conjunto de técnicas que son compatibles con el inmunomarcaje y permiten la observación ultraestructural de las muestras biológicas con el microscopio electrónico. Aunque el orden de las etapas es distinto en cada uno de los métodos, todos ellos incluyen la fijación, el marcaje, el seccionamiento y la visualización del tejido. Por un lado, los principales métodos convencionales son preinclusión y postinclusión, mientras que por el otro, se comentan un conjunto de alternativas basadas en la congelación de la muestra. Entre estas últimas estrategias existe una gran variedad de combinaciones en las que se relacionan diferentes técnicas. Así, en algunas se lleva a cabo la criofijación de la muestra, mientras que en otras se incluye la misma en resina. Para el inmunomarcaje a nivel ultraestructural es aconsejable utilizar partículas de oro como marcador, ya que son muy electrodensas y pueden adaptarse a diferentes condiciones según el tipo de estudio. El inmunomarcaje con oro también puede ser aplicado a microscopía óptica, de manera que se pueden aprovechar las ventajas de ambos tipos de microscopios para facilitar el estudio de las muestras.