Localización de la enzima mitocondrial SOD2 en el testículo de ratón

Abstract

Las especies reactivas de oxígeno (EROs) son moléculas capaces de actuar como segundos mensajeros y desencadenar respuestas de supervivencia. Sin embargo, si sobrepasan las concentraciones fisiológicas, las consecuencias pueden ser perjudiciales para la célula debido al estrés oxidativo que generan. Para contrarrestar el posible efecto nocivo de estas moléculas existen los antioxidantes, dentro de los cuales, la superóxido dismutasa dependiente de manganeso (SOD2) constituye la primera línea de defensa. Esta enzima ejerce su función en la mitocondria, donde se encarga de transformar el anión superóxido en peróxido de hidrógeno. Se ha observado que las EROs con capaces de contribuir a la diferenciación celular en el testículo. Sin embargo, irregularidades en los niveles de enzimas antioxidantes pueden conducir a desajustes en la diferenciación y en última instancia, provocar reducción del contenido espermático e infertilidad. Debido a su importancia en la correcta diferenciación de las células espermatogénicas, se pretende localizar la proteína SOD2 en el testículo de ratón y estudiar cómo afecta la variación en los niveles de esta proteína a dicho proceso. Se cree que un descenso en los niveles de SOD2 podría hacer que el balance oxidantes – antioxidantes se decantara a favor de los primeros y esto alterase el proceso de diferenciación. Para localizar la proteína se realizaron ensayos de inmunohistoquímica e inmunofluorescencia. Además se cuantificó morfométricamente el número de espermatogonias y espermatocitos y, mediante PCR-semicuantitativa, se estudió el efecto que produce la variación de SOD2 sobre las distintas estirpes celulares. Los resultados muestran que la mayor expresión de este antioxidante se produce en las células de Leydig, aunque también hay cierta expresión en las células espermatogénicas. En cuanto al recuento morfométrico, los ratones con una copia menos del gen Sod2 presentan menos espermatocitos a las 10 y a las 24 semanas. Estos datos se verifican con los obtenidos con la PCR-semicuantitativa, donde se observa que tanto espermatocitos como espermátidas disminuyen notablemente en los ratones SOD+/- a las 10 y 24 semanas respecto a los de 6 semanas y a sus controles WT de la misma edad. Estos resultados apoyan la hipótesis inicial; niveles disminuidos de la enzima SOD2 pueden conducir a un desajuste en el proceso de diferenciación a lo largo del tiempo, el cual a su vez puede estar intensificado por el incremento en los niveles de EROs que se producen con la edad y la falta de un sistema antioxidante eficaz.