Identificación de genes implicados en el desarrollo de meristemos inducidos por benciladenina en tejidos de Pinus spp.

Abstract

La formación in vitro de brotes alventicios es un buen sistema para estudiar el desarrollo de las plantas. Para esclarecer los eventos que tienen lugar durante el desarrollo de yemas adventicias in vitro en coníferas, es necesario evaluar los genes que participan en él. A día de hoy, los estudios realizados se centran en angiospermas, no pudiéndose extrapolar al caso de las coníferas, por ello nos hemos propuesto estudiar 7 genes (ARR1, CLV1L, WUS, KN1, KN2, KN3 y KN4) implicados putativamente en el desarrollo de meristemos inducidos por benciladenina (BA) en Pinus pinea L. Para ello se han cultivado cotiledones de embriones no germinados en medio de inducción ½ LP suplementado con diferentes concentraciones de BA (2,2 μM, 4,4 μM, 8,8 μM, 22 μM, 44 μM y 88 μM) y transferidos a medio ½ LPC sin hormona transcurridos los 2, 4, 8 y 16 días de inducción. Se ha evaluado la respuesta caulogénica y el número de yemas por cotiledón después de 60 días de cultivo. Los resultados muestran que el periodo de inducción mínimo para la formación de yemas adventicias es de 4 días durante los cuales las células meristemáticas adquieren la competencia. A partir del cuarto día, las células se encuentran determinadas a la formación de yemas. Se ha podido relacionar positivamente la repuesta caulogénica con la concentración de BA. Por otro lado, se ha estudiado la expresión de los 7 genes mostrando que los genes ARR1 y CLV1L se expresan durante la etapa de adquisición de competencia y podrían ser homólogos a los genes ARR1 y CLV1L de Arabidopsis; los genes WUS, KN1, KN2, KN3 y KN4 se expresan durante la etapa de determinación