Análisis molecular de dos transportadores ABC implicados en la resistencia y secreción de oleandomicina por Streptomyces antibioticus

Abstract

El presente trabajo aborda la caracterización de un determinante de resistencia a oleandomicina (OleC) procedente del productor de oleandomicina Streptomyces antibioticus. También se ha comparado con un segundo determinante de resistencia (OleC) previamente caracterizado. La secuenciación del determinante de resistencia mostró la presencia de cinco pautas abiertas de lectura, una de las cuales (OleC) es la responsable de la resistencia y mostró homología con otras proteínas pertenecientes a la familia de los transportadores ABC, a la cual también pertenece el producto del gen OleB. El gen OleC está acoplado transcripcionalmente a un segundo gen (OleC5) cuya proteína deducida presenta seis dominios transmembranales característicos de proteínas integrales de membrana. Este dato se ha comprobado por medio de estudios de topología de membrana. Ambas proteínas (OleC y OleB) mostraron una localización subcelular citoplásmica, lo cual fue demostrado utilizando anticuerpos policlonales y fraccionamiento celular. La síntesis de OleB es paralela a la de oleandomicina lo cual sugiere una regulación coordinada de la producción de ambos productos. También se ha demostrado que OleB es capaz de transportar oleandomicina y oleandomicina glucosilada al exterior celular. A través de la construcción de transportadores híbridos realizados a partir de los genes OleC y OleC5 así como otros genes de resistencia de diferentes productores de antibióticos, se ha demostrado que el gen OleC junto con OleC5 podría funcionar como un sistema de multirresistencia a diversos antibióticos.