La cromatografía liquida micelar : su aplicación al análisis de compuestos de interés clínico

Abstract

Una de las principales ventajas de la cromatografía líquida micelar (MLC) es la posibilidad de inyección directa de fluidos biológicos (suero, orina, etc.) en el sistema cromatográfico sin necesidad de separar previamente las proteínas de la muestra. Sin embargo, hasta el momento se han descrito relativamente pocas aplicaciones de la MLC al análisis de drogas y fármacos en dichos fluidos. En la presente tesis doctoral se aportan nuevos datos a cerca de las ventajas y limitaciones de la técnica MLC, evaluando en columnas convencionales de fase inversa al efecto de fases móviles micelares sobre el comportamiento cromatográfico de solutos de especial importancia biomédica, concretamente, las drogas anticancerígenos 6-mercaptopurina (6-MP) y 6-tioguanina (6-TG) y algunos de sus metabolitos 6-mercaptopurina ribosido (6-MPR), 6-tioguanosina (6-TGR) y 6-tioxantina (6-TX), así como el agente quelante desferrioxamina (DFO) y sus complejos con Fe(III) y Al(III). En primer lugar, se ha puesto a punto un método mediante MLC con fases móviles micelares del tensoactivo aniónico dodecilsulfato sódico (SDS) para el análisis de 6-tiopurinas tanto en preparados farmacéuticos como en suero humano, con inyección directa de las muestras en el cromatógrafo, en un rango de concentraciones comprendido entre el límite de detección y 4 µg/ml. En segundo lugar, la técnica de MLC empleando fases móviles micelares del tensoactivo aniónico SDS o del no-iónico polioxietilen23dodecil éter (BRIJ-35) permite la separación de DFO de sus quelatos con hierro y aluminio, y resulta ser adecuada para la determinación de DFO en suero humano con inyección directa de la muestra, si bien, los límites de detección obtenidos con detección espectrofotométrica no son adecuados para aplicar dicha metodología al análisis de DFO en muestras reales. En consecuencia, se ha desarrollado finalmente un método analítico mediante HPLC convencionales (fases móviles hidroorgánicas …)